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有關(guān)羥自由基試劑盒的幾個(gè)問(wèn)題

發(fā)布時(shí)間：2014/2/8 9:23:05　瀏覽次數：3520　[字號：大 中 小]　 [關(guān)閉此頁(yè)　打印此頁(yè)]

近期對其中相關(guān)指標進(jìn)行了探索，對其中有些問(wèn)題心存疑惑，考慮到近期試驗的需要，望盡快解答。

有關(guān)羥自由基試劑盒的幾個(gè)問(wèn)題：

第一，多次試驗發(fā)現實(shí)驗數據（包括標準管、對照管等）的平行性不是很好，不同時(shí)間測定相應結果有時(shí)相差較大，請問(wèn)這點(diǎn)如何解決？

第二，考慮到羥自由基本身的一些原因，請問(wèn)測定中主要需注意什么問(wèn)題??？比如測定時(shí)間，測定條件等。

第三，在探索最佳濃度時(shí)，發(fā)現同樣存在平行性較差的情況，而且，再次探索最佳濃度時(shí)，發(fā)現最佳濃度發(fā)生了變化。請問(wèn)是不是此后每次試驗前必須先進(jìn)行最佳濃度的探索，而后才能進(jìn)行正式樣品的大批量測定？

有關(guān)GR（谷胱苷肽還原酶）的測定：

近期試驗發(fā)現，2分30秒測定的吸光度與30秒測定的吸光度差值較小，一般在0.005左右，考慮到染毒試驗，請問(wèn)染毒后差值是否會(huì )有顯著(zhù)變化？也就是GR活性是否會(huì )有較顯著(zhù)變化？

回復：

羥自由基試劑盒操作確實(shí)要求較高，由于反應時(shí)間較短，對樣本加入量的準確性，控制反應的時(shí)間，要求都較高！同時(shí)樣本的穩定性也不好，所以制備好勻漿后（破碎細胞后），2-8℃冷藏盡快完成檢測（不可過(guò)夜）！

批量檢測之前需要做預實(shí)驗確定最佳樣本濃度！查我們檢測記錄，出現平行較差的情況，一般有3點(diǎn)：1、樣本及試劑二加入量有誤差；2、反應時(shí)間控制有偏差；3、樣本存放時(shí)間偏長(cháng)，勻漿不均一，導致加樣有偏差！

GR測定，如果2次OD變化值太小，也就是樣本中的GR表達較低，如需改善，一般有2點(diǎn)：1、加大樣本濃度或取樣量；2、延長(cháng)反應時(shí)間！

心肌灌注的冠脈流出液中的LDH和CK的測定

細胞膜上和肌漿網(wǎng)上的鈣-ATPase測定的問(wèn)題？