魚(yú)體肝臟勻漿做一些指標的取樣濃度？
發(fā)布時(shí)間：2014/2/8 9:00:59 瀏覽次數：5342 [字號：大 中 小] [關(guān)閉此頁(yè) 打印此頁(yè)]
之前我們用貴所的蛋白質(zhì)，總SOD、CAT、MDA、試劑盒測定過(guò)程當中都有一個(gè)最佳取樣量摸索的問(wèn)題，現在我們試圖增加新指標，分別是羥自由基，GSH、GSH-PX、GSH-ST、GR的試劑盒，在閱讀完說(shuō)明書(shū)我們發(fā)現其中有幾樣指標并沒(méi)有給出最佳取樣量的說(shuō)明，有羥自由基，GR、GSH-ST、GSH。因為我們做的是魚(yú)體肝臟勻漿，并不是通常測定的小鼠肝臟勻漿，在勻漿濃度上我們可能還需要更多的參考，請問(wèn)有什么意見(jiàn)可以給我在各個(gè)指標測定中勻漿濃度有更多的參考依據。
另外樣品測定過(guò)程中不可避免的會(huì )遇到樣品保存的問(wèn)題，勻漿完保存樣品在測定上會(huì )不會(huì )有較大的影響呢，因為樣本是魚(yú)體肝臟，不像老鼠肝臟會(huì )比較大塊，我們不能保存肝臟樣，會(huì )將其勻漿后保存
另外在自由基測定上，試劑二應用液配制針對抑制和產(chǎn)生自由基有不同的配法，我對備注中給出的對組織樣品會(huì )抑制自由基有點(diǎn)疑惑，是否可以麻煩解答。
回復：
1、從肝勻漿的測定記錄來(lái)看，GR、GSH、GSH-ST一般都是直接用10%勻漿進(jìn)行測定。但是羥自由基試劑盒，都需要做預實(shí)驗（隨貨說(shuō)明書(shū)上有附錄，專(zhuān)門(mén)關(guān)于預實(shí)驗的操作詳細流程）
2、關(guān)于樣本的保存，一般我們都是建議直接保存組織，一旦制備勻漿以后相關(guān)指標的穩定性都不好！像老師的指標，羥自由基、GR最好是要當天完成，GSH-ST和GSH可以第二天完成（4℃密封保存）
3、羥自由基測定，我們試劑盒主要檢測的是抑制羥自由基的能力和產(chǎn)生羥自由基能力，動(dòng)物實(shí)驗（血清、組織）包括細胞試驗，一般都是表達出抑制羥自由基為主。如果老師測定肝組織的話(huà)，試劑二肯定是按照抑制羥自由基的來(lái)配制的！
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